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血液中酒精含量檢測(cè)氣相色譜法

更新日期: 2016-04-29
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血液中酒精含量檢測(cè)氣相色譜法

 酒精的作用在醫(yī)學(xué)和法醫(yī)學(xué)上都很有意義。當(dāng)醫(yī)生需要知道酒精是否與病人的病情有關(guān)時(shí),對(duì)血液或尿液中酒精的含量的估計(jì)就會(huì)起到相當(dāng)關(guān)健的作用。從法醫(yī)學(xué)的觀點(diǎn)來(lái)看,酒精含量在突然死亡、駕駛事故以及有關(guān)以喝醉酒作為防衛(wèi)性辯解等案件中是至關(guān)重要的。決定攝入酒后顯示出大乙醇濃度及量的時(shí)間的因素是:對(duì)象的體重、乙醇的量及濃度、攝入乙醇的方式、有無(wú)食物存在以及對(duì)象的身體狀況。

   酒精的影響對(duì)不同的人以及在不同時(shí)間的同一個(gè)體都是各不相同的。其作用主要取決于各人的所處的環(huán)境和體質(zhì)以及所飲酒精的稀釋情況。飲用同等量的酒精對(duì)習(xí)慣性飲酒者所造成的影響較偶爾飲酒者小得多。藥物有加強(qiáng)酒精效果的作用。

   很多案例表明,酒精與巴比土酸鹽類的協(xié)同作用是一些看似是自殺的死亡的一個(gè)原因,酒精本身可能是常見(jiàn)的中毒致死的原因。

   裝配有火焰離子化檢測(cè)器及Porapak Q柱的氣-固色譜技術(shù)在藥物制備中一直被用來(lái)鑒定和檢測(cè)乙醇、異丙醇以及丙酮。此項(xiàng)技術(shù)是用稀釋過(guò)的樣品的水溶液直接進(jìn)樣, 方法簡(jiǎn)單而直接。

樣品制備 將兩份0.5毫升的異丁醇內(nèi)標(biāo)物 (濃度為10mg/ml水,其配制法為:用吸量管吸取12.4ml 異丁醇用水稀釋至1L ), 用吸量管分別吸入兩個(gè)不同的2-打蘭(7.4毫升)的殼型小瓶中, 一個(gè)標(biāo)為已知”, 另一個(gè)標(biāo)為未知”。取0.5ml乙醇作標(biāo)準(zhǔn)物 (濃度為50mg/100ml血液,其配制法為:吸5ml乙醇貯存液,再?gòu)难獛?kù)中取100ml血液加以稀釋;所用的乙醇貯存液的配制法為:用水將12.7 ml的無(wú)水乙醇稀釋至1升),并將其轉(zhuǎn)移至一個(gè)標(biāo)為已知”的小瓶中。吸量管用內(nèi)標(biāo)溶液洗滌三次。用一支10微升的亨氏注射器, 取0.5微升的已知樣和未知樣各兩份進(jìn)樣, 分別測(cè)量乙醇和異丁醇的峰高。

 

氣相色譜參數(shù) 使用一臺(tái)配有氫火焰檢測(cè)器的氣相色譜儀?;鹧骐x子化檢測(cè)器可用于檢測(cè)含水的樣品。柱子為不銹鋼材料(6英尺×0.25英寸外徑), 用30%聚乙二醇2萬(wàn)固定相涂布在用酸洗過(guò)的60-80目的Chromosorb W 擔(dān)體上。柱子用氮?dú)庾鬏d氣于180°C下吹掃過(guò)葉。操作條件為:

爐溫 100或130°C

進(jìn)樣口溫度 160°C

氮?dú)饬魉?nbsp;35ml/min

氫氣流速 28ml/min

氧氣流速 100ml/min

 

計(jì)算 用酒精和內(nèi)標(biāo)物的峰高進(jìn)行計(jì)算,可采用下式進(jìn)行計(jì)算:

式中: W= 乙醇的毫克數(shù)

              W= 100毫升的未知物

         C標(biāo)準(zhǔn)乙醇溶液的濃度(50mg/ml)

              h = 已知物中乙醇的峰高

              hs = 未知物中內(nèi)標(biāo)物(異丁醇)的峰高

              R= 已知物中乙醇的峰高

              R= 已知樣中內(nèi)標(biāo)物(異丁醇)的峰高

討論

   圖 顯示了一份通過(guò)注射0.5微升血液-異丁醇內(nèi)標(biāo)混合物而獲得的典型的色譜圖。圖中各峰都被清楚地分開而且峰很尖銳。表1給出了一些常見(jiàn)的揮發(fā)性化合物的保留時(shí)間和相對(duì)保留時(shí)間,這些揮發(fā)性化合物都與酒精的攝取、糖尿病及嗜好嗅粘接劑中的有機(jī)溶劑味等病有關(guān)。。

   操作參數(shù)如柱溫或載氣流速并不是確定不變的,它們可隨所研究的化合物的類型及所用氣相色譜儀的性質(zhì)不同而改變。

   其它填料也可用于該測(cè)定,包括Hallcomid M 180L 涂布在Chromosorb W 80-100 目的擔(dān)體上或Porapark Q 80-100 目的填料。Porapak 有不同的特性但它的優(yōu)點(diǎn)是它是一種無(wú)需涂層的填料。

   注入系統(tǒng)的血液進(jìn)入進(jìn)樣口并在那里被捕集,而揮發(fā)物被載氣帶入柱中。在柱中進(jìn)樣將會(huì)堵塞柱子。所以,如果使用一個(gè)長(zhǎng)的進(jìn)樣口,將有利于多次進(jìn)樣并能延長(zhǎng)使用周期。使用六至八個(gè)月后,應(yīng)將進(jìn)樣口拆開并除去被捕集在此的血液,若有必要,可用水清洗。儀器應(yīng)在被再次使用前穩(wěn)定一夜。

   根據(jù)峰高進(jìn)行定量測(cè)定是令人滿意的,但是,若所獲得的峰太寬或不對(duì)稱,也可根據(jù)峰面積進(jìn)行定量。

表 1 一些化合物的保留值

化合物

爐溫100度

爐溫130度

保留時(shí)間(min)

相對(duì)保留時(shí)間(相對(duì)于EtOH)

保留時(shí)間(min)

相對(duì)保留時(shí)間 (相對(duì)于EtOH)

乙醛

2.56

0.73

1.25

0.60

丙酮

2.38

0.68

1.62

0.76

氯仿

5.62

1.61

3.25

1.53

乙醇

3.50

1.00

2.12

1.00

異丁醇

7.25

2.10

3.94

1.86

異丙醇l

3.19

0.91

2.06

0.97

乙酸丙酯

4.50

1.29

2.75

1.30

 

 

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